agosto 13, 2022
Técnicas Modernas de Investigación en Ciencia de Alimentos

Técnicas Modernas de Investigación en Ciencia de Alimentos

Hoy en día la producción de alimentos se realiza a escalas muy grandes en varias partes del mundo. Contar con técnicas modernas para conocer la inocuidad de los alimentos viene siendo una labor indispensable que los gobernantes deben tomar en serio. La contaminación de los alimentos en alguno de los procesos que la industria alimentaria tiene, puede conllevar a un grave problema para la sociedad, perjudicando la salud de las personas y trae consigo el desequilibrio de la economía del país.

Técnicas Modernas de Investigación en Ciencia de Alimentos

En el texto Técnicas Modernas de Investigación en Ciencia de Alimentos, usted encontrara la siguiente información:

INTRODUCCIÓN: GENERALIDADES SOBRE TECNICAS MODERNAS EMPLEADAS EN LA INVESTIGACION DE ALIMENTOS. 

1.1 Marco Actual de la Investigación en el Área de Alimentos. Dimensión compleja de los alimentos.
1.2 Métodos Analíticos usados en Investigación en Alimentos. 

1.2.1. Cromatografía líquida (CL). 
1.2.3. Cromatografía gaseosa (GC).
1.2.4 Cromatografía líquida (CL) o gaseosa (CG) acoplada a un Espectrómetro de Masas (MS)
1.2.5. Ionización de electrospray (ESI-MS). 
1.2.6. El sistema de Cromatografía líquida de “Ultra Performance”. 
1.2.7. Espectrometría de masas por plasma inductivamente acoplado (ICPMS). 
1.2.8 Espectroscopia Infrarroja con transformación de Fourier (EITF ó FTIR) 

CONCEPTOS BÁSICOS DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR Y ALGUNAS TÉCNICAS BÁSICAS DE IDENTIFICACIÓN EN MICROBIOLOGÍA DE ALIMENTOS.

2.1 Técnicas Aplicadas a la identificación de Microbios en Alimentos.

Pruebas morfológicas. 
Respuestas bioquímicas directas. 
Respuestas bioquímicas ante habilidades metabólicas complejas. 
Diferencias respecto a factores extrínsecos. 
Pruebas moleculares de identificación. 

2.2 Algunos Conceptos de Biología y Bioquímica Molecular 

2.2.1 La Bioquímica y Biología molecular. 
2.2.2 El ADN o DNA (en Inglés). 
2.2.3 Algunas Técnicas básicas de biología Molecular. 
a) Reacción en cadena de la polimerasa (PCR )
b) Gel electroforesis 
c) ITS (del inglés: “internal transcribed spacer”). 
d) La fracción 16S rDNA. 
a) RAPD 

2.2.4 Introducción a algunas aplicaciones prácticas para la Identificación de microrganismos con técnicas moleculares.

CARACTERÍSTICAS INSTRUMENTALES DE LOS LECTORES DE MICROPOZOS DE UBICACIÓN ACTUAL EN EL MERCADO. 

3.1 Luz, absorción, emisión y Lectores: Conceptos básicos.
3.2 Luz: Conceptos Básicos. 

3.2.1 Transmitancia. 
3.2.2 Absorbancia. 
3.2.3 Dispersión. 
3.2.4 Fotoluminiscencia: Fluorescencia y Fosforescencia. 
3.2.5 Quimioluminiscencia, Bioluminiscencia. 

3.3 Lectores. Comparación entre lector de absorbancia en cubetas tipo celdas vs lector de absorbancia en micropozos. 
3.4. Origen de los lectores en formato de micropozos. 

3.4.1 Aplicaciones de Absorción Ultravioleta, Visible y Emisión en Fluorescencia en la Investigación con Alimentos. 
3.4.2 Algunas de las ventajas y desventajas de los formatos de micropozos. 

3.5 Ubicación Actual de los Lectores de Micropozos en el Mercado. 

3.5.1. Equipos con sistema de detección uni-modal “Single-mode detection” 
3.5.1.1. Detectores de Absorbancia. 
3.5.1.2. Detectores de Fluorescencia. 
3.5.1.3. Detectores de Luminiscencia. 
3.5.2. Equipos con múltiples sistemas de detección. 
3.5.3 Accesorios comunes en laboratorios para lectores de micropozos. 

EL LECTOR DE MICROPOZON EN ANALISIS FISICO-QUIMICO DE ALIMENTOS Y ALGUNAS APLICACIONES PRÁCTICAS 

4.1 Cuantificación de proteínas mediante lecturas en el rango ultravioleta. 
4.2 Cuantificación de Carbohidratos. 
4.3 Oxidación de beta-caroteno. 
4.4 Aminoácidos libres en Quesos. 
4.5 Medición de los aminoácidos libres 
4.6 Aplicaciones Prácticas 

4.6.1 Ensayo total de Proteína “Método Bradford” 
4.6.1 .1 Reactivos y materiales: 
4.6.1.2 Preparación de la curva estándar. 
4.6.1.3 Leer la Absorbancia. 
4.6.1.4 Cálculo de la concentración proteica. 
4.6.2. Ensayo de Fenólicos Totales en formato de micropozos 
4.6.2. 1. Posibles interferencias. 
4.6.2.2. Reactivos Químicos: 
4.6.2.3. Preparación de la curva estándar y análisis de las muestras. 
4.6.2.4. Leer la Absorbancia 
4.6.2.5 Cálculo de la concentración de Fenólicos. 
4.6.3 Determinación de la capacidad de absorción de especies radicales libres de oxígeno (ORAC) en formato de micropozos. 
4.6.3.1. Procedimiento. 
4.6.3.2. Reactivos. 
4.6.3.3. Posibles interferencias. 
4.6.3.4. Preparación de la curva estándar y análisis de las muestras. 
4.6.3.5 Cálculo de la concentración de los valores ORAC. 

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TÉCNICAS MOLECULARES APLICADAS A ALIMENTOS, INSTRUMENTACIÓN UTILIZADA EN BIOLOGÍA MOLECULAR Y ALGUNAS APLICACIONES.

5.1. Técnicas moleculares aplicadas a Alimentos. 

5.1.1 Algunas definiciones: 
5.1.1.2 Reacción en cadena de la Polimerasa (PCR). 
5.1.1.3 Multiplex PCR. 
5.1.1.4 “Nested” PCR (PCR anidada). 
5.1.1.5 PCR- RFLP. 
5.1.1.6 PCR en tiempo real. 
5.1.1.7. Amplificación de RNA. Se utilizan técnicas como las de amplificación de transcripción reversa (RT-PCR) 
5.1.1.8 Secuenciación del ADN. 
5.1.1.9 Un Microarray de DNA “Microarray Technology”. 
5.1.1.10 Aplicaciones recientes de la tecnología de los microarreglos o “microarrays” en la Industria de los Alimentos. 
A. Identificación de un origen transgénico en los alimentos: 
B. Aplicaciones en la detección de Adulteraciones: 
C. Aplicaciones en la investigación de los efectos moleculares de los ingredientes bioactivos de los alimentos. 
D. Aplicaciones en el estudio de los genes de resistencia bacterianos. 
E. Aplicaciones en la industria cárnica. 
F. Aplicaciones en la industria vitivinícola. 

5.2 Instrumentación Utilizada para las Técnicas Moleculares: 

5.2.1. Para la extracción de ADN: 
5.2.2 Los Termocicladores. 
5.2.3. Equipo de PCR en tiempo real.
Partes de un PCR en tiempo real. 
5.2.4. Equipos utilizados para evaluar la calidad del ADN amplificado. 
5.2.4.1 El equipo del Nanodrop TM
5.2.4.2 Técnicas de electroforesis y “blotting”.
5.2.4.2.1 Electroforesis en gel. 
5.2.4.2.2. Técnicas de Blotting. 
5.2.4.2.3. Lectores de Microarray “scanners”. 

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE TÉCNICAS MOLECULARES EN LA INVESTIGACIÓN DE INOCUIDAD DE LOS ALIMENTOS. (APLICACIONES PRÁCTICAS) 

6.1 Principales métodos de identificación de agentes causantes de ETAS. 
6.2. Métodos moleculares utilizados en la identificación de agentes de ETAS. 

6.2.1 Ventajas y desventajas del análisis de microrganismos mediante técnicas de PCR. 
6.2.2 Alternativas adoptadas, para vencer las desventajas mencionadas anteriormente. 

6.3 Descripción de los métodos moleculares usados en la identificación de microrganismos causantes de enfermedades infecciosas. 

6.3.1 Electroforesis en campo pulsado o pulsante (PFGE). 
6.3.2 Análisis del número variable de tándems repetidos en locus múltiples (MLVA). 
6.3.3 Técnica de amplificación al azar de ADN polimórfico (RAPD) y PCR con iniciadores arbitrarios (AP-PCR). 
6.3.4 Ribotipado. 
6.3.5 Polimorfismo singular de nucleótidos (SNP) “snip”. 
6.3.6 Secuenciamiento de ácidos nucleicos en uno o varios loci. 
6.3.7 Técnicas de AFLP. 
6.3.8 Técnica de electroforesis en gel con gradiente de desnaturalización (DGGE). 
6.3.9 Método de PCR en tiempo real con sistema de detección de tipo sonda fluorescente no dependiente de una secuencia específica. 
6.3.10 Combinación de hibridación con PCR. 
6.3.11 Sistema BAX para E. coli O157:H7. 

6.4. Ejemplo de algunas aplicaciones de técnicas moleculares en el estudio de la inocuidad de alimentos. 
6.5 Identificación de especies animales. 

VENTAJAS Y DESVENTAJAS TÉCNICAS DE INVESTIGACIÓN CON LECTOR DE MICROPOZOS, EN LA INVESTIGACIÓN ENZIMATICA Y DE INOCUIDAD DE LOS ALIMENTOS. (APLICACIONES PRÁCTICAS)

7.1 Aplicaciones en estudios en actividad enzimática. 
7.2 Estudios de viabilidad celular. 
7.3 Determinación de cianógenos totales de cassava. (Manihot esculenta Crantz) (Yuca). 
7.4 Aplicaciones prácticas del lector de micropozos al campo de los inmunoensayos. 

7.4.1 ELISA Competitivo. 
7.4.2 Detección de Bisphenol A en formato de ELISA. 
7.4.3 Detección de Melanina en Formato de ELISA competitivo. 
7.4.4 Monitoreo de Crecimiento Microbiano. 

La autora del texto es PATRICIA GLORIO PAULET, Ph.D

Técnicas Modernas de Investigación en Ciencia de Alimentos


 

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